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［文章编号］ 1005⁃6661（2013）06⁃0590⁃04 ·论著·
植物杀螺剂“螺威”高原山区灭螺效果
黄宁波1，李炳桂2△*，李文豹2，冯锡光1，熊孟韬1，李亮1，
母亮先2，田淑惠2，李萍2，宋志忠1，贾铁武3*
［摘要］ 目的 评价植物杀螺剂4%螺威粉剂（TDS）在云南高原山区的灭螺效果。方法 在云南省鹤庆县选择沟渠和草地，采用2.5 g/m3和5 g/m2 TDS开展浸杀和喷洒试验，同时以50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂（WPN）作为对照，比较两组不同环境、时间的杀螺效果。结果 浸杀后24、48、72 h，TDS组钉螺死亡率分别为70.67%、87.33%、98.67%，WPN组分别为77.33%、96.67%、100.00%，浸杀后24、72 h钉螺死亡率差异均无统计学意义（ χ224 h =1.73，χ272 h =2.01，P 均＞0.05）；浸杀后7 d，TDS组活螺框出现率和钉螺死亡率分别为20.00%和93.08％，WPN组分别为13.33%和95.76％，两组比较差异均无统计学意义（ χ2出现率= 2.27，χ2死亡率= 0.94，P 均＞0.05）。喷洒灭螺后1、3、7、15 d，随时间延长两组活螺框出现率和活螺平均密度均逐渐下降，钉螺死亡率逐渐增高，但各指标差异均无统计学意义（P 均＞0.05）；喷洒后15 d，TDS组活螺框出现率和校正钉螺死亡率分别为15.00%和87.39％，WPN组分别为16.67%和89.32％。结论 TDS在云南高原山区现场灭螺效果良好，值得进一步推广应用。
［关键词］ 钉螺；4%螺威粉剂；氯硝柳胺乙醇胺盐；灭螺效果；高原山区
［中图分类号］ R383.24 ［文献标识码］ A
［基金项目］ 国家科技支撑计划（2009BAI78B07）
［作者单位］ 1 云南省地方病防治研究所（大理671000）；2 云南省鹤庆县血吸虫病防治站；3 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所，世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心，卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室
［作者简介］ 黄宁波，男，主管医师。研究方向：血吸虫病控制和管理
△ 共同第一作者
* 通信作者E⁃mail：bgliynhq@163.com；jiatiewu@gmail.com
4%螺威粉剂（Tea⁃seed distilled saponins，TDS）是一种新型植物杀螺剂。近期有关TDS灭螺效果的系列研究表明其在湖沼地区和山丘地区杀螺效果均较好［1⁃3］。为评价TDS在云南高原血吸虫病流行区的灭螺效果，2013年8-9月在云南省鹤庆县高原山区金墩乡孝廉村开展了TDS 和50%氯硝柳胺乙醇胺盐（WPN）的现场灭螺试验。
材料和方法
1 现场与分组
选择金墩乡孝廉行政村北登自然村的沟渠和草地2 种有螺环境分别进行浸杀和喷洒试验，沟渠长580 m，草地面积为20 383 m2。现场活螺平均密度＞10 只/0.1 m2，钉螺自然死亡率＜5%。将沟渠分成3段，段长分别为206、182、168 m，面积分别为309、273、252 m2，分别设为TDS组、WPN组、空白对照组，各区之间间隔＞1 m。将草地分成3部分，每部分面积分别为6 781、6 478、7 124 m2，分别设为TDS 组、WPN组、空白对照组；TDS组和WPN组施药前先进行环境清理和人工割草除障，使草茬高度＜5 cm，空白组不进行处理。
2 材料
2.1 TDS 由湖北金海潮科技有限公司提供，农业部农药登记证号为PD20131345，生产批准文件号为HNP42071⁃N0048，产品标准号为Q/JHC01⁃2012，生产批号为130303，生产日期为2013⁃03⁃28。WPN为安徽亚华医药化工有限公司生产，农药登记证号为PD20083238，农药生产许可证为HNP34090⁃N0013，生产批号为1302013，生产日期为2013⁃02⁃01 。
2.2 灭螺机械液药灭螺机由江苏大浩科技实业有限公司生产。
2.3 钉螺及螺袋制作在该村有螺环境捕捉钉螺2 000只，清洗后置于30 cm×40 cm方盘中，加入适量清水，选取爬出方盘的成螺，装入10 cm×15 cm的纱布袋中，每袋装螺50只，共计27袋。
3 灭螺试验及效果评价
3.1 浸杀灭螺 灭螺前放水灌满沟渠，使水位稳定3 d，投药前测算水量。各组按40～50 m打段，段间无水间隔＞1 m。按照各段水量和各试验药品的灭螺浓度（TDS 2.5 g/m3、WPN 2 g/m3）计算药量，先将药物完全溶解配制成10～20 L母液，再施入各试验段，同时充分搅拌水体，使药物迅速离散，均匀分布，空白组不施药。每一试验组等距离设置上中下3处螺袋投放点，每点悬吊3袋钉螺于药液中，每组投放9个螺袋。分别于钉螺触药后24、48、72 h在投放点各取1个螺袋，用脱氯水冲洗3次，室内饲养72 h后用敲击法鉴定钉螺死活，记录各组总螺数和死亡螺数，统计钉螺死亡率。施药前和施药后7 d用系统抽样法进行查螺，每组调查15框，每10 m调查1框，捕捉框内全部钉螺，分框装袋，捕获的钉螺用同样方法鉴定死活。试验期间记录水温、气温等。
3.2 喷洒灭螺 按环境面积和灭螺剂量（TDS 5 g/m2、WPN 2 g/m2）计算施药总量，采用灭螺机直接喷洒，空白对照组喷洒等量清水。每组分别于施药前和施药后1、3、7 d和15 d用同样方法查螺，每区调查60框，10 m×10 m设框，每次调查时标记起始点，避免重复落框，钉螺鉴定方法同上。试验期间记录水温、气温等。
3.3 效果评价 计算各组钉螺死亡率、活螺框出现率、活螺密度等指标，并进行统计学分析，P＜0.05为差异有统计学意义［4］。
结果
1 现场基本情况
试验现场主要植被种为杂草，其海拔（2 188.0±26.1）m，经纬度N 26°30 ′ 38.3 ″ ，E 100°12 ′ 15.6 ″ 。沟渠活螺平均密度11.66只/ 0.1 m2（2099/180），草地活螺平均密度为8.64只/ 0.1 m2（389/45）。试验期间现场气温23～27 ℃，水温19～22 ℃，5 d降雨，降雨量为10 mm。
2 灭螺效果
2.1 浸杀试验 浸杀24、48、72 h，TDS组钉螺死亡率分别为70.67%（106/150）、87.33%，（131/150）、98.67%（148/150），WPN组钉螺死亡率分别为77.33%（116/150）、96.67%（145/150）、100.00%（150/150），随浸杀时间延长两组钉螺死亡率均呈逐渐上升趋势。浸杀24、72 h后，两组钉螺死亡率差异均无统计学意义（ χ224h =1.73，χ272h =2.01，P 均＞0.05），浸杀48 h，两组钉螺死亡率差异有统计学意义（χ2 = 8.88，P＜0.01）。灭螺后7 d，TDS组活螺框出现率和活螺平均密度分别为20.00%和0.60只/0.1 m2，较灭螺前下降了57.14％和93.43％ ，钉螺死亡率为93.08% ，校正死亡率为93.03％；WPN组活螺框出现率和活螺平均密度分别为13.33%和0.33 只/0.1 m2，分别较灭螺前下降了71.43％和96.22％，钉螺死亡率为95.76%，校正死亡
率达到95.76％。两组活螺框出现率和钉螺死亡率差异均无统计学意义（ χ2出现率=2.27，χ2死亡率=0.94，P 均＞0.05）（表1）。
表1 鹤庆县高原山区沟渠TDS和WPN浸杀灭螺效果
Table 1 Molluscicidal effects of TDS andWPN by immersion test in ditches of mountain plateau areas in Heqing County
|
组别 Group |
浸杀后天数 Days after immersion（d） |
活螺框出现率 Occurrence rate of frames with living snails（%） |
活螺平均密度 Average density of living snails （No./0.1 m2） |
钉螺死亡率 Snail mortality（%） |
校正钉螺死亡率 Adjusted mortality of snails（%） |
|
TDS |
基线Baseline |
46.67（7/15） |
9.13（137/15） |
0.72（1/138） |
- |
|
7 d |
20.00（3/15） |
0.60（9/15） |
93.08（121/130） |
93.03 |
|
|
WPN |
基线Baseline |
46.67（7/15） |
8.73（131/15） |
0.00（0/131） |
- |
|
7 d |
13.33（2/15） |
0.33（5/15） |
95.76（113/118） |
95.76 |
2.2 喷洒灭螺 TDS组和WPN组喷洒灭螺后1、3、7、15 d，随时间延长活螺框出现率和活螺平均密度逐渐下降，钉螺死亡率逐渐增高。灭螺后15 d，TDS组活螺框出现率和活螺平均密度分别为15.00%和0.90只/0.1 m2，较灭螺前下降了64.00％和92.47％，校正钉螺死亡率达到87.39％；WPN组活螺框出现率和活螺平均密度分别为16.67%和0.87只/0.1 m2，较灭螺前下降了58.33％ 和92.92％ ，钉螺校正死亡率达到89.32％。灭螺后1、3、7、15 d，两组活螺框出现率差异均无统计学意义（ χ21d = 0.05，χ23d = 0.24，χ27d =0.00，χ215d= 0.06，P 均＞0.05），钉螺死亡率差异均无统计学意义（χ21d= 0.73，χ23d= 3.22，χ27d= 1.50，χ215d=0.85，P 均＞0.05），活螺平均密度下降率基本相同（表2）。
讨论
灭螺是控制血吸虫病流行的重要手段之一，主要包括生态、物理和药物灭螺3大类，其中药物灭螺是目前采用的主要方法［5⁃6］。氯硝柳胺作为普遍使用的灭螺药在我国血吸虫病流行区的钉螺控制中起到了极大的作用［7］。但由于目前国内常用灭螺剂多为化学合成药剂，存在其他靶生物（如淡水鱼类）毒性、环境污染和价格昂贵等问题［8⁃9］。植物灭螺药物的有效成分为根、茎、叶、花、果或籽等植物器官的提取物，具有低毒和易降解等优点，越来越受到WHO和各国疾控部门的关注［10］。湖北金海潮科技有限公司从油茶籽饼（粕）中提取五环三萜类物质，成功研制并批量生产了新型植物杀螺剂——TDS［11⁃13］。室内与室外药效试验显示，该粉剂对湖北钉螺杀灭效果好，具有高效、低毒、廉价、环保和使用方便等优点［14⁃15］。本次现场灭螺试验表明，浸杀灭螺后，随浸杀时间延长TDS组钉螺死亡率逐渐上升，72 h 钉螺死亡率达到98.67%；灭螺后7 d，活螺框出现率和活螺平均密度分别较基线调查下降了57.14％和93.43％，钉螺校正死亡率达到93.03％。TDS喷洒灭螺后，随时间延长活螺框出现率和活螺平均密度均逐渐下降，钉螺死亡率逐渐增高；灭螺后15 d，活螺框出现率和活螺平均密度较灭螺前下降了64.00％和92.47％，钉螺校正死亡率达到87.39％。且浸杀24、72 h后，TDS组与WPN组钉螺死亡率，以及浸杀和喷洒灭螺前后两组活螺框出现率、活螺平均密度、钉螺死亡率差异均无统计学意义。以上结果说明TDS在云南高原山区现场的灭螺效果良好，值得进一步扩大应用。
表2 鹤庆县山区草地环境TDS和WPN喷洒灭螺效果
Table 2 Molluscicidal effects of TDS andWPN by spray test in grassland of plateau mountain areas in Heqing County
|
试验分组 Group |
喷洒后天数 Days after spraying |
活螺框出现率 Occurrence rate of frames with living snails(%) |
活螺平均密度 Average density of living snails(No. /0.1 m2) |
钉螺死亡率 Snail mortality(%) |
钉螺校正死亡率 Adjusted mortality of snails(%) |
|
TDS |
基线 |
41.67（25/60） |
11.95（717/60） |
0.42（3/720） |
- |
|
1 d |
21.67（13/60） |
3.02（181/60） |
69.68（416/597） |
69.55 |
|
|
3 d |
18.33（11/60） |
1.72（103/60） |
78.18（369/472） |
78.09 |
|
|
7 d |
15.00（9/60） |
0.80（48/60） |
88.43（367/415） |
88.39 |
|
|
15 d |
15.00（9/60） |
0.90（54/60） |
87.44（376/430） |
87.39 |
|
|
WPN |
基线 |
40.00（24/60） |
12.28（737/60） |
0.67（5/742） |
- |
|
1 d |
20.00（12/60） |
2.58（155/60） |
71.97（398/553） |
71.78 |
|
|
3 d |
15.00（9/60） |
1.08（65/60） |
83.07（319/384） |
82.96 |
|
|
7 d |
15.00（9/60） |
0.77（46/60） |
90.89（459/505） |
90.83 |
|
|
15 d |
16.67（10/60） |
0.87（52/60） |
89.39（438/490） |
89.32 |
|
|
空白Blank |
基线 |
40.00（24/60） |
10.75（645/60） |
0.62（4/649） |
- |
|
1 d |
38.33（23/60） |
11.03（662/60） |
0.90（6/668） |
0.28 |
|
|
3 d |
35.00（21/60） |
10.07（604/60） |
0.66（4/608） |
0.04 |
|
|
7 d |
41.67（25/60） |
10.13（608/60） |
0.98（6/614） |
0.36 |
|
|
15 d |
35.00（21/60） |
9.87（589/60） |
0.84（5/594） |
0.23 |
［参考文献］
［1］贾铁武，孙乐平，洪青标，等.“螺威”植物杀螺剂现场灭螺效果研究与示范Ⅰ湖沼地区草洲喷洒灭螺效果观察［J］. 中国血吸虫病防治杂志，2013，25（2）：125⁃128.
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［收稿日期］ 2013⁃09⁃29 ［编辑］ 邓瑶
